Plasmodium falciparum (P. falciparum) and P. vivax malaria is endemic to many parts of the world and humans can be co-infected with both species. Since each Plasmodium has different biological and clinical characteristics, accurate differentiation of the infecting species is essential for effective treatment. Therefore, we produced 3 monoclonal antibodies that recognize the lactate dehydrogenase of P. falciparum, P. vivax, or both to develop the first P. falciparum, P. vivax, and mixed-species infections (FVM) malaria antigen detection kit. The limits of detection of this kit were 150 and 250 parasites??L-1 for P. falciparum and P. vivax, respectively, and the kit was able to detect mixed-species infections. The sensitivity and specificity of this kit was assessed with 722 clinical specimens. Our results showed that its sensitivities for P. falciparum, P. vivax, and mixed-species infection were 96.5%, 95.3%, and 85.7%, respectively. In addition, its specificity was very high (99.4%).