Objective  To simultaneously detect viable Cryptosporidium parvum oocysts and Giardia duodenalis cysts for the purpose of reducing time and cost spent.  Methods  A duplex reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) method was newly developed.  Results  Using duplex RT-PCR method for the hsp70 gene, viable (oo)cyst concentrations of 10^1 and 10^3 (oo)cysts/100 μL could be detected for C. parvum and G. duodenalis, respectively. However, after heat-shock stimulation the expression of hsp70 mRNAs was detectable at 100 and 101 (oo)cysts/100 μL concentrations of C. parvum and G. duodenalis, respectively. Thus, the detection sensitivity was significantly increased when the viable (oo)cysts were exposed to heat shock.  Conclusion  This study describes a new duplex RT-PCR method for hsp70 gene to detect the viable (oo)cysts of the C. parvum and G. duodenalis with less time consumed and at a lower cost. This newly developed duplex RT-PCR method may be used to detect these parasites not only in aquatic environments but also in clinical samples.
Keywords: Cryptosporidium parvum; Giardia duodenalis; Heat-shock; RT-PCR