This study is conducted to examine spatial variations of Dissolved Organic Matter (DOM) in stream and waste waters of the different watershed areas (agricultural, residential, and industrial complex area) by using fluorescence 3D-EEMs (3 Dimensional Excitation Emission Matrix Spectroscopy). Furthermore, the research investigates the changes of DOM characterization by synchronous and 3D-EEMs during a rainfall event. 
The characterizations of DOM obtained by 3D-EEMs show two noticeable peaks at humic and protein-like regions. Humic-like substances (HLS) are found in rural and urban areas, and humic and protein-like substances are shown in industrial area. According to the fluorescence peak T1:C1 ratios, it was observed that high amount of HLS was discharged from Banweol Industrial Complex (3TG). Additionally, linear relationships (Regression rate, r2=0.65, r2=0.66) have been shown between PLS (peak T1, B1) and biochemical oxygen demand (BOD), which indicates the impact of sewage. For the rainfall event (30 mm), no remarkable difference of DOM was found at rural area except increment of fluorescence intensity comparing dry period. In contrast, HLS at urban area was highly discharged within 30 minutes from the beginning of rainfall. Also, there were high influences of HLS and PLS within 20 minutes at industrial complex (4TG). Fluorescence 3D-EEMs has not only verifies a watershed of DOM origination but also monitors diffuse and point source impacts.